რადიოიმუნური ანალიზი მიკრობიოლოგიაში: გამოყენება, მექანიზმი

Სარჩევი:

რადიოიმუნური ანალიზი მიკრობიოლოგიაში: გამოყენება, მექანიზმი
რადიოიმუნური ანალიზი მიკრობიოლოგიაში: გამოყენება, მექანიზმი
Anonim

თანამედროვე მედიცინას აქვს სპეციფიკური დიაგნოსტიკური მეთოდები, რომლებიც შესაძლებელს ხდის ადამიანებში დაავადების ეტიოლოგიის დადგენას პათოგენის, გენეტიკურად უცხო ნივთიერებების, იმუნური პასუხის სტიმულირების, ნუკლეინის მჟავების, აგრეთვე ალერგიული და იმუნური ცვლილებების განსაზღვრაზე. რაც ხდება მისი ქმედებების გამო. დღეს RIA ფართოდ გამოიყენება იმუნოლოგიასა და ვირუსოლოგიაში, ანუ რადიოიმუნოანალიზში, დაყენების მიზნები, კომპონენტები, კურსი, რომელთა აღრიცხვასაც განვიხილავთ ამ სტატიაში. ამ ანალიზს შეუძლია ანტიგენების აღმოჩენა ანტისხეულებთან მათი ურთიერთქმედების შედეგად.

რადიოიმუნოანალიზი
რადიოიმუნოანალიზი

განმარტება

RIA არის სითხეებში ბიოლოგიურად აქტიური ნივთიერებების დიაგნოსტიკის მეთოდი, რომელიც ემყარება ანტიგენების რეაქციას ანტისხეულებთან რადიონუკლიდური მარკირებული ანალოგიური ნივთიერებების გამოყენებისას, რომლებსაც აქვთ სპეციალური შემაკავშირებელი სისტემები. მათი ურთიერთობის შემდეგიქმნება იმუნური კომპლექსი, რომელიც გამოიყოფა და შესწავლილია მისი რადიოაქტიურობა. ცნობილია, რომ რადიოიმუნოანალიზი ტარდება სტანდარტული რეაგენტების ნაკრების გამოყენებით.

თითოეულ რეაგენტს შეუძლია განსაზღვროს ერთი კონკრეტული ნივთიერების კონცენტრაცია. ადამიანიდან აღებულ ბიოლოგიურ სითხეს ურევენ რეაგენტს, ინკუბაციური პერიოდის შემდეგ ხდება თავისუფალი და შეკრული რადიოაქტიური ნივთიერებების გამოყოფა, შემდეგ ტარდება რადიომეტრია და გამოითვლება შედეგები. იოდის იზოტოპი გამოიყენება ნივთიერებების მარკირებისთვის. იგი მონიშნულია და დამატებულია გარკვეული რაოდენობით.

რადიოიმუნოანალიზის მიკრობიოლოგია
რადიოიმუნოანალიზის მიკრობიოლოგია

აპლიკაცია

რადიოიმუნურ ანალიზს ფართო გამოყენება აქვს მედიცინასა და მიკრობიოლოგიაში. იგი გამოიყენება გულის და სისხლძარღვთა დაავადებების, ენდოკრინული და სხეულის სხვა სისტემების დაავადებების დიაგნოსტიკისთვის. RIA ასევე ხშირად გამოიყენება უნაყოფობის მიზეზის, ნაყოფის განვითარების პათოლოგიის დასადგენად. ონკოლოგიაში ეს ანალიზი ტარდება ნეოპლაზმების მარკერების დასადგენად, რათა შესაძლებელი იყოს მკურნალობის ეფექტურობის მონიტორინგი. იმუნოლოგიაში RIA გამოიყენება სისხლში იმუნოგლობულინების, ფერმენტების, ცილების და ა.შ. დღეს ეს ანალიზი საშუალებას გაძლევთ გამოავლინოთ სხვადასხვა ჰორმონების კონცენტრაცია ერთი გრამის მემილიონედამდე. ამრიგად, რადიოიმუნური სისხლის ანალიზი ფართოდ გამოიყენება კარდიოლოგიაში, ონკოლოგიაში, ენდოკრინოლოგიაში, გინეკოლოგიასა და ვირუსოლოგიაში.

რადიოიმუნოანალიზის გამოყენება
რადიოიმუნოანალიზის გამოყენება

RIA მეთოდები

ჩვეულებრივია განასხვავოთ ანალიზის რამდენიმე მეთოდი, ბუნებიდან გამომდინარერეაქციები:

  1. არაკონკურენტული მეთოდი ხასიათდება ისეთი რეაქციის კომპონენტებით, როგორიცაა სტანდარტული და აღმოჩენილი ანტიგენები, ბუფერული ხსნარი, იზოტოპებით მონიშნული ანტისხეულები, გარკვეული ანტისხეულები, რომლებიც აკავშირებენ სორბენტს. შესამოწმებელ ანტისხეულებს ემატება ანტიგენი. ინკუბაციის შემდეგ ჩნდება ანტიგენ-ანტისხეულის კომპლექსები, ირეცხება სორბენტი, ემატება ეტიკეტირებული ანტისხეულები, რომლებიც აკავშირებენ კომპლექსში არსებულ ანტიგენს. რადიოაქტიურობა დამოკიდებულია შესამოწმებელი ანტიგენის კონცენტრაციაზე.
  2. კონკურენტული რადიოიმუნოანალიზი განპირობებულია ანტიგენის კონკურენციით. აქ არის რეაქციის ისეთი კომპონენტები, როგორიცაა საკონტროლო და განსაზღვრული ანტიგენები, ბუფერული ხსნარი, გარკვეული ანტისხეულები, რომლებიც აკავშირებენ სორბენტს, ასევე იზოტოპებით მონიშნული ანტიგენი. დიაგნოზი იწყება იმ ანტიგენის შემოღებით, რომელიც გამოკვლეულია. სორბენტზე წარმოიქმნება ანტიგენ-ანტისხეულის კომპლექსი. შემდეგ სორბენტი ირეცხება და ეტიკეტირებული ანტიგენი შეჰყავთ. ამით ის აკავშირებს ანტისხეულს. მრიცხველების დახმარებით იზომება რეაქცია და რადიაქტიურობის რაოდენობა. ეს იქნება შებრუნებული პროპორციული ანტიგენის ოდენობის ნიმუშში.
  3. ირიბი მეთოდი ყველაზე გავრცელებულია. ამ შემთხვევაში, რეაქციის კომპონენტის რადიოიმუნოანალიზს აქვს ისეთი საკონტროლო და სატესტო შრატი, ანტიგენები ან ანტისხეულები, რომლებიც დაკავშირებულია სორბენტზე, იზოტოპებით მონიშნული ანტისხეულები, ბუფერული ხსნარები. ანტისხეულები ან ანტიგენები, რომლებიც დიაგნოზირებულია, რეაგირებენ ანტიგენებთან ან ანტისხეულებთან, რომლებიც დაკავშირებულია სორბენტთან. შემდეგ ინკუბატი ამოღებულია, ეტიკეტირებული ანტისხეულები შეჰყავთ, რომლებიც აკავშირებენანტიგენ-ანტისხეულის კომპლექსები.

ანალიზის მეთოდოლოგია

ასე რომ, რადიოიმუნოანალიზი ტარდება სპეციალური რეაგენტების გამოყენებით. კომპლექტები სტანდარტულია, ამიტომ ნებისმიერი შეცდომა ან დარღვევა დაუშვებელია. დიაგნოსტიკური შედეგები საიმედოა. ანალიზი ტარდება დილით, ამისთვის იღებენ ვენურ სისხლს ადამიანისგან. ლაბორატორიაში სისხლიდან გამოიყოფა შრატი, რომელიც გამოყენებული იქნება RIA-სთვის. ეს შრატი შერეულია რეაგენტებთან. მიღებული ნარევი ინკუბირებულია მოცემულ ტემპერატურაზე თერმოსტატში.

მიღებულ ნარევში გამოიყოფა

თავისუფალი და შეკრული იზოტოპები. ამის შემდეგ ხდება მიღებული მასალის შემოწმება, შედეგების დაანგარიშება. რადიოიმუნოანალიზის მექანიზმს რამდენიმე ვარიანტი აქვს. ზემოთ აღწერილი ტექნიკა არის თხევადი ფაზის RIA, რადგან ყველა კომპონენტი თხევად მდგომარეობაშია. არსებობს RIA და მყარი ფაზა, სადაც ანტისხეულები მოთავსებულია მატარებელში, რომელიც არ იხსნება სითხეში.

რადიოიმუნური სისხლის ტესტი
რადიოიმუნური სისხლის ტესტი

დიაგნოსტიკის ხელმისაწვდომობა

ამ დიაგნოსტიკური მეთოდის გამოყენება მედიცინაში ყოველწლიურად სულ უფრო პოპულარული ხდება. ბოლო დროს რადიოიმუნოანალიზი გახდა სტანდარტული დიაგნოსტიკური მეთოდი, რომლის დანიშვნაც შესაძლებელია ექიმმა საბოლოო დიაგნოზის დასმისას. დიდი ხნის განმავლობაში ამ ტიპის ანალიზს მხოლოდ ლაბორატორიებში ატარებდნენ, დღეს ის გახდა საერთო კვლევის მეთოდი. მაგრამ RIA მოითხოვს ძვირადღირებული აღჭურვილობის გამოყენებას (გამა მრიცხველები), ხოლო რეაგენტების კომპლექტებს აქვთ მოკლე მომსახურების ვადა. ეს ყველაფერი არის ასეთი ანალიზის მთავარი ნაკლი, რომელიც განსაზღვრავს მისძვირი ღირებულება.

გარდა ამისა, RIA-მ ახლახან დაიწყო კვლევის უფრო თანამედროვე მეთოდების ჩანაცვლება, რომლებიც არ საჭიროებს იზოტოპებთან ურთიერთქმედებას. ეს მოიცავს ფერმენტის იმუნოანალიზს. ამრიგად, RIA სასურველია ბევრ კლინიკაში. იგი დიდი ხანია გამოიყენება დიდ ქალაქებში და დიაგნოსტიკურ ცენტრებში, მაგრამ პატარა ქალაქების ჩვეულებრივ საავადმყოფოებში ეს ანალიზი პრაქტიკულად არ გამოიყენება მისი მაღალი ღირებულების გამო.

რადიოიმუნოანალიზის კომპონენტები
რადიოიმუნოანალიზის კომპონენტები

რიას ღირსება

რადიოიმუნოანალიზს ბევრი უპირატესობა აქვს. ის საკმაოდ სპეციფიკურია და აქვს მაღალი მგრძნობელობა, რაც შესაძლებელს ხდის ბიოლოგიურად აქტიური ნივთიერებების წარმოუდგენლად მცირე რაოდენობით არსებობის დადგენას. ეს ანალიზი ტარდება ძალიან მარტივად, ადამიანს მხოლოდ ვენური სისხლის დონაცია მოეთხოვება. ტესტის შედეგები 100% ზუსტია და მზად არის მეორე დღეს. RIA ასევე შეიძლება ადვილად ავტომატიზირებული იყოს. ამრიგად, ეს ანალიზი საშუალებას გაძლევთ იდენტიფიციროთ ცილები, რომლებიც წარმოადგენენ ინფექციური ბაქტერიების ნარჩენ პროდუქტებს, რაც მიუთითებს ორგანიზმში ინფექციის არსებობაზე.

კომპონენტების პროგრესის აღრიცხვის მიზნის დასახვის რადიოიმუნური ანალიზი
კომპონენტების პროგრესის აღრიცხვის მიზნის დასახვის რადიოიმუნური ანალიზი

დიაგნოსტიკა ვირუსოლოგიაში

ყველაზე პერსპექტიული RIA არის ვირუსოლოგია, რადგან ის საშუალებას გაძლევთ სწრაფად ამოიცნოთ ვირუსული პათოგენები. ეს გამოწვეულია იმით, რომ ბოლო წლებში მატულობს სხვადასხვა ინფექციების შემთხვევები, რომლებიც დიდი სისწრაფით ვრცელდება და ადამიანებში სიკვდილიანობას იწვევს. ეს განსაკუთრებით ეხება ქვეყნებს, რომლებსაც არ აქვთ მაღალისოციალური და ეკონომიკური განვითარება (შორეული აღმოსავლეთის ქვეყნები), რადიოიმუნოანალიზი აქ უბრალოდ შეუცვლელია. მიკრობიოლოგია ასევე იყენებს ამ დიაგნოსტიკურ მეთოდს პათოგენური ბაქტერიებით გამოწვეული ინფექციური დაავადებების გამოსავლენად. მაგალითად, RIA ფართოდ გამოიყენება ტიფური ცხელების გამოსავლენად. დაავადების პირველ დღეებში, მკურნალობის დანიშვნამდე აუცილებელია განავლის და ღებინების შესწავლა. თუმცა დიაგნოსტიკური შედეგები დიდი ხნის შემდეგ მიიღება. აქ RIA მოდის სამაშველოში, ანალიზი საშუალებას გაძლევთ მოკლე დროში დაადგინოთ დაავადების გამომწვევი აგენტი. ადამიანი აბარებს სისხლს, მეორე დღეს კვლევის შედეგები მზად არის. ეს ანალიზი გვეხმარება ზუსტი დიაგნოზის დასმაში.

შედეგები

რადიოიმუნოანალიზი ამჟამად ერთ-ერთი ყველაზე მგრძნობიარე დიაგნოსტიკური მეთოდია. იგი გამოიყენება ნებისმიერი ნივთიერების გასაანალიზებლად, რომლის წინააღმდეგაც შესაძლებელია ანტისხეულების მიღება. ეს მეთოდი შესაძლებელს ხდის მრავალი ნიმუშის დამზადებას გამოკვლეული სითხის უმცირეს მოცულობაში, ასევე შედეგების ჩაწერას უმოკლეს დროში, ვინაიდან მისი სრული ავტომატიზაცია შესაძლებელია. ეს ანალიზი 1950-იან წლებში სოლომონ ბურსონმა შეიმუშავა. ოცდაათი წლის შემდეგ იგი ფართოდ გავრცელდა. დღემდე, RIA-ს ასი პროცენტიანი ალტერნატივა არ არსებობს, რადგან ანალიზს აქვს მაღალი მგრძნობელობა. RIA გამოიყენება მედიცინის სხვადასხვა დარგში, ასევე მიკრობიოლოგიასა და ვირუსოლოგიაში.

რადიოიმუნოანალიზის მექანიზმი
რადიოიმუნოანალიზის მექანიზმი

საბოლოოდ

მეთოდის გამოყენება ვირუსოლოგიაში დღეს ძალიან აქტუალურია, როგორც ეს იძლევაინფექციების გავრცელების შესწავლის, ზუსტი დიაგნოზის და სპეციფიკური მკურნალობის დანიშვნის შესაძლებლობა. ეს პრობლემა განსაკუთრებით აქტუალურია ეკონომიკისა და სოციალური განვითარების დაბალი დონის მქონე ქვეყნებისთვის. ასევე, ეს ანალიზი საშუალებას გაძლევთ გამოავლინოთ ჰორმონების და ფერმენტების რაოდენობა ადამიანის ორგანიზმში. სანდო შედეგების მისაღებად მკვლევარს მხოლოდ ანალიზისთვის სისხლის დონაცია სჭირდება. მედიცინა არ დგას, რადიოიმუნოანალიზთან ერთად, ჩნდება კვლევის ახალი მეთოდები, მაგრამ RIA კვლავ რჩება ერთ-ერთ ლიდერად სამედიცინო დიაგნოსტიკაში.

გირჩევთ: